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加强规模化猪场病原细菌分离和抗生素耐药性监测

   日期:2016-01-11     来源:聚农网    作者:jn720.com    浏览:105    
 近年来,在畜牧业中随着抗生素的使用,出现了大量的耐药菌株,给疾病的预防和治疗带来了严重后果,严重威胁动物健康和人类健康。在养猪行业中,已有报道致病性大肠杆菌、沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、链球菌中,大量的菌株对许多兽医临床使用的抗生素都具有耐药性,更有甚着,部分菌株同时对18种抗生素具有耐药性。目前新药的研发速度远远落后于抗生素耐药性的出现速度,降低了抗生素的有效使用寿命,并且还降低了疾病的预防和治疗效果,增加了生产成本。细菌产生耐药性的主要机制有:1)降低外膜通透性,使抗生素不易进入细菌体内;2)产生钝化酶或灭活酶使抗生素失效(主要是对β-内酰胺类抗生素);3)通过突变使药物靶位点改变;4)主动外排泵系统将进入细菌内的抗生素分子泵出,使不能达到有效的胞内浓度。

 

表一、图一、图二和图三为已报道的猪场临床分离的致病大肠杆菌和链球菌的耐药情况,均表现为严重的耐药性和多重耐药性,绝大多数菌株同时对十多种的抗生素具有耐药性。即便就是从临床健康猪也可以分离出链球菌,并且检出率高,同时检测株对临床使用频率较高的抗生素耐药情况严重,主要有四环素、大环内酯类、头孢菌素类、喹诺酮类以及磺胺类抗生素,并且出现了大量多重耐药株。

在此背景下,我国从保护养殖业持续发展和人民健康安全的角度出发,启动了动物源细菌耐药性监测项目,对同一养殖场对不同饲养阶段的动物定期分别采样;主要采集泄殖腔拭子或动物组织,用以分离大肠杆菌、沙门氏菌、金葡菌、空肠弯曲菌等,测定这些菌株的MIC(最小抑菌浓度),来评价该养殖场的耐药性流行情况,为合理用药提供理论基础,为全国性耐药性的监测提供可靠数据和资料。

与耐药菌抗争必须掌握住关键性“武器”---药敏实验,因此猪病的诊断现在正在从临床解剖走向实验室检测。监测临床常见细菌的耐药性现状、预测细菌耐药性变迁,以采取合理有效的措施,遏制细菌耐药性的蔓延;根据细菌耐药性监测数据,制定合理使用抗菌药物的指导原则,规范临床抗感染治疗;这些已成为保护人畜健康的当务之急。细菌耐药性监测的主要意义在于:(1)了解致病菌的耐药机制以正确选用抗菌药;(2)了解当地致病菌耐药机制的发展趋势,以制订区域性的抗菌药物使用指南;(3)了解细菌耐药性的发生原因,以阻止耐药性的发展。

目前最为普遍的药敏实验方法为纸片扩散法和MIC测定。其中纸片法扩散法是最适合常规实验室使用。其特点是方便、易操作,测定的药物随意可变,灵活性强。重要的是纸片法药敏试验有一套完善的质量控制方法,结果相当可靠。纸片法唯一的不足是中度耐药的菌株会出现问题。而MIC测定是把抗菌药物倍比稀释在肉汤或琼脂中定量测定MIC的方法。稀释法可以精确测定一些厌氧菌及苛养菌(对生长环境、营养要求较苛刻的细菌),而对这些菌,纸片扩散法是无能为力的。琼脂稀释法较肉汤稀释法精确的原因在于细菌的生长情况可查,且一套平皿可测多株细菌,这两种方法的缺点都耗时费力。对于药敏实验结果的判定分为以下三个标准:

敏感 (Susceptibillity, S):表明该菌株所致感染可以用推荐的抗菌药物剂量进行治疗,除非存在禁忌症。

中等(Intermediate, I):用抗菌药物MIC浓度治疗菌株感染,可使血液和组织中药物浓度接近通常可达到的水平,而抗生素治疗的反应率可能低于敏感株。意味着药物生理浓度部位具有临床效力(如尿液中的喹诺酮类和β-内酰胺类)或可用高于正常剂量的药物进行治疗(β-内酰胺类)。该类还包括一个缓冲区,可防止微小的,未能控制的技术因素造成的结果解释错误,特别是对那些安全范围窄的药物。

耐药(Resistance, R):指按常规剂量使用,抗生素通常达到的全身浓度不能抑制其生长的菌株,和/或某些抗菌药物的抑菌圈直径在耐药机制范围,且临床治疗效果不可靠。

通过测定病原菌的敏感性,可以做到抗生素的合理使用,有效控制疫病;并且避免抗药菌株的出现,减少养殖成本;为耐药性监测及流行病学调查提供临床可靠的资料。因此如果不做病原分离和药敏实验,将会出现以下结果:1)治疗过度,用药不当,过度使用抗生素;2)治疗错误----用药错误,延误治疗效果;3)增加细菌的耐药性的出现;4)增加生产成本和治疗费用;5)影响食品安全,危及人类健康。

在兽医临床使用抗生素预防和治疗疾病过程中,还要做的联合使用、轮换使用和有计划的阶段性使用抗生素。抗生素正确和合理的使用将会提高治疗和预防效果、减少细菌耐药性产生、降低成本。如果不合理的使用将使菌群失调,二重感染、导致细菌发展多重耐药、病情或疫情恶化、增加治疗成本等等。

综述可见,我们不仅要对病猪病料进行病原分离和药敏实验,还要定期对临床健康猪群的致病菌携带情况进行调查和病原分离,掌握它们对各种抗生素的耐药情况,为更好地监控病原菌耐药性、防治细菌病以及有效防控细菌性传染病的暴发具有重要价值。

目前,回盛生物科技有限公司拥有兽医检测实验室,具备病原分离和耐药性监测的仪器设备和人员,特面向广大养殖户提供猪源病原菌的分离以及耐药性检测服务,为广大养殖户养好猪保驾护航。

表1 来源于郭潇木,中国畜牧兽医, 2014, (01): 182-186 

图1来源于郭潇木,中国畜牧兽医, 2014,(01): 182-186 

图2 来源于黄文明,中国畜牧兽医, 2013, (05): 54-58 

图3来源于黄文明,中国畜牧兽医, 2013, (05): 54-58 

 
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