(一)细菌学检查
鼻外部消毒后,用无菌棉拭子插出鼻腔中较深的部位,轻轻转动几次,使其沾上黏液或分泌物,立即放人装有肉汤的小试管中,塞紧管塞,送检。也可直接无菌采取鼻腔后部、支气管的分泌物及肺组织等。
4h内进行细菌分离培养,可应用改良马丁琼脂(含牛裂解血球液0.1%、牛血清2%、盐酸洁霉素1μg/mL,硫酸新霉素1.9μg/m L)平板和血红素痢特灵改良麦康凯琼脂(彭发泉等1986)平板,37℃培养18h分离Pm,培养44h分离Bb 。 Bb分离株依据菌落特征和平板凝集反应加以鉴定,Bb37℃培养24h,菌落呈针尖大小;48h菌落为2mm大,呈灰褐色,半透明状、隆起、光滑,有特殊霉臭味。涂片、染色、镜检。革兰染色,可见到革兰阴性小杆菌,有两极着色的趋势。
生化鉴定,支气管败血波氏杆菌主要的生化特点是:有运动性,甲基红试验、VP试验均为阴性,不分解葡萄糖二分解尿素,能利用枸橼酸盐,过氧化氢酶和氧化酶试验均为阳性。
(二)Pm分离株的产毒素能力检查
采用豚鼠皮肤坏死试验( DeJong,M.F.1980)进行。用马丁肉汤37℃培养36h的菌液O.lmL注射于体重350g的健康豚鼠背部皮内,观察72h。皮肤出现直径大于0.5cm以上的坏死区为阳性反应(DNT+),无反应或仅一过性红肿为阴性(DNT-)。
(三)X射线摄片检查