用流产胎儿胃内容物或阴道分泌物等材料制成菲薄的涂片，干燥、火焰固定后，用沙黄一孔雀绿染色法染色，布鲁氏菌被染成淡红色、小球状杆菌，其他细菌或细胞为绿色或蓝色。也可观察其培养特性。
小动物感染试验：应用豚鼠接种分离的布鲁氏菌，比用培养基分离可靠，因病料内细菌不多时，用培养基分离培养常不能生长。正式试验时，取子宫分泌物、乳汁流产胎儿胃内容物、羊水、精液或病变组织，制成混悬液等，给2只体重350 - 400g的豚鼠皮下或腹腔接种，一般为0.5-1.0 - 2.0mL，接种后第2周开始采血，以后，每隔7-10d采血1次，检查血清抗体，如凝集价达1:5以上时，即认为是阳性反应，证明已感染了布鲁氏菌，此时，可从豚鼠心血中分离培养细菌，即使分离不到细菌，也可判为已感染布鲁氏菌。通常一只在接种后第三周剖杀，另一只在第6周剖杀，如见到鼠蹊淋巴结与腰下淋巴结肿大，脾肿大、表面粗糙，有结节状病灶，肝脏有灰白色细小平坦的坏死小结节，更可进一步证实试验的阳性结果；若注射的豚鼠不发病，剖检无病变，脏器分离培养阴性，可报告阴性。如为公豚鼠，腹腔接种时，可引起睾丸炎。如在接种后第3个月末，豚鼠不发病，未死亡，血清反应仍阴性，可报告为阴性。
（二）血清学试验
1．凝集反应 动物感染布鲁氏菌的4-5d后，血液中即出现凝集素，随后凝集滴度逐渐增高，能持续1-2年或更久，以试管凝集反应检查时，猪在1:50达“++”或“++"以上者，判为阳性反应，在1: 25达“++”时为疑似反应。大群检疫时，为提高效率，可用玻板凝集反应，猪血清在0.04mL处凝集，判为阳性反应；在0.08mL处凝集时，判为疑似反应。
判为可疑的猪，3-4周后应采血重检，如仍为可疑反应。可按以下情况来确定，即该群中既无本病的流行病情况发生，也无临床病例出现，血检也无阳性时，则可判为阴性反应。
2．虎红平板凝集反应 虎红布鲁氏菌有色抗原呈酸性，且具有缓冲作用，并能抑制引起非特异性反应的IgM的活性和增强特异性IgG的活性，使反应的敏感性提高，特异性优于常规试管凝集反应。检验时，取被检血清与虎红抗原各0.03mL，滴加于平板上混匀，放置4 - 10min观察结果二只要有凝集现象出现，即可判为阳性反应。
3．其他方法‘荧光抗体染色法、间接炭凝集反应、间接红细胞凝集反应、协同凝集试验、特异性花结吸附染色、酶标SPA染色、二巯基乙醇（2-ME）凝集反应、补体结合反应、细胞免疫检查法、乳汁环状反应、热凝集反应、凝胶电泳法等均可用于布鲁氏菌病的诊断。阎守敦等(1990)应用凝胶电泳法来鉴别布氏杆菌的人工感染和疫苗接种。近年来，间接血凝试验、抗球蛋白(Coombs)试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光抗体法、DNA探针以及聚合酶链式反应(PCR)等新的方法逐渐被用于本病诊断或检疫。
