疫苗的免疫作用主要有细胞免疫和体液免疫两种方式。这两种免疫的主要异同和关系如下表所示:
表1. 体液免疫和细胞免疫比较
细胞免疫概念有广义和狭义之分,广义是指经特异性细胞(如细胞毒T淋巴细胞—CTL)和非特异性细胞(如巨噬细胞—Mφ、自然杀伤细胞—NK)活性增强的免疫反应;狭义是指T细胞介导的免疫。
CTL具有抗原识别受体,它们必需经抗原(蓝耳病毒或猪瘟病毒等)激发才能活化发挥其效应细胞的作用,因此称为特异性细胞免疫。
非特异性细胞免疫细胞在其细胞表面不具有抗原识别受体,因此它们的活化无需经抗原激发即能发挥效应细胞的作用,故称为非特异性细胞免疫。
CTL通过细胞裂解和细胞凋亡两种机制,直接杀伤被病毒侵入的靶细胞,或释放在细胞内复制的病毒体,从而在特异性体液免疫中产生的抗体的配合下清除病毒。由此可见,细胞免疫和体液免疫具有协同作用。同时,CTL还可通过分泌多种细胞因子,如干扰素IFN-γ、肿瘤坏死因子TNF等而发挥抗病毒作用。
干扰素是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用。由此可见,细胞免疫的特异性和非特异性又是相互联系的。
动物发生感染时,免疫系统启动的是体液免疫还是细胞免疫取决于病原入侵的种类和入侵的途径。对于细胞外病原体(如细菌、寄生虫、真菌)免疫系统可以直接清除或中和其产物(如毒素),抗体起重要作用;对胞内病原体(如病毒、某些细菌和寄生虫),免疫系统动员T细胞,或直接杀灭感染细胞(细胞毒性),或者释放细胞因子激活其他细胞(如巨噬细胞),进而清除胞内病原体。
机体对无包膜病毒的抵抗力主要来自抗体(体液免疫),对有包膜的RNA病毒的抵抗力主要来自细胞免疫(Janeway Jr. et al. 1999),PRSSV就是一种有包膜的RNA病毒,因此,PRSSV弱毒苗控制暴发的蓝耳病的免疫作用主要来自细胞免疫。有包膜的病毒还有猪瘟病毒、鸡新城疫病毒等。关于猪瘟疫苗和鸡新城疫疫苗的细胞免疫作用有过报道,如:有研究用C株疫苗接种猪6d后外周血中即出现CSFV特异性干扰素分泌细胞(细胞免疫应答的标志),此时虽然检测不到中和抗体,但猪却能抵抗强毒的攻击。通常猪瘟的中和抗体在注射猪瘟疫苗后2-3周才能够监测到。LaiS S等(1982)证实用C株接种后2-4d,即能对强毒攻击产生一定的保护。这表明中和抗体在建立早起免疫中并未发挥作用,而细胞免疫可能提供免疫保护。又如:有人用ND(新城疫)和IBD(鸡传染性法氏囊病)油乳剂灭火苗在鸡群中进行了试验,虽然试验中各组鸡群T淋巴细胞增殖、分化的可测时间是短暂的(免疫3d后开始活化, 7 d后达高峰,17 d后下降接近正常水平),但结果表明:细胞免疫在鸡ND 或IBD 抗体产生以前的免疫期内发挥着非常重要的作用(黄兵等,2000)。虽然接种猪瘟疫苗后能快速产生体液免疫反应,但其体液免疫启动之前的细胞免疫作用也是不可忽视的。有关PRSSV常规疫苗的细胞免疫研究未见报道,但陈希文, 程安春等(2006)用其基因疫苗pcDNA-PRRSV ORF5接种小鼠,结果表明: pcDNA-PRRSV-ORF5 免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答, 并表现一定的剂量依赖性。
在上述情况下,疫苗的作用都是优先启动细胞免疫。这就是在处理爆发的蓝耳病时紧急免疫接种可迅速控制疾病的道理所在。此时疾病得以控制不要误以为是体液免疫产生的抗体起了作用,因为猪感染PRRSV 后9d虽然即可用ELISA 方法检测到特异性抗体(非中和抗体), 但中和抗体的产生相对较慢, 一般是在感染PRRSV 后4-5周才出现, 63-77 d后才慢慢升高, 并且之后开始呈下降趋势(Kyoung -Jin Yoon,et al.,1995)。此时关键因素是蓝耳苗的细胞免疫作用。因为猪瘟苗和鸡新城疫疫苗对于有包膜的RNA病毒均有优先启动细胞免疫的作用,所以当这些疾病爆发时,实行紧急接种可以收到迅速控制疾病的效果,甚至当蓝耳病爆发时,用大剂量猪瘟苗或鸡新城疫疫苗紧急接种也有效,这是因为这类苗的非特异性细胞免疫作用(如产生广谱的抗病毒的干扰素)所致。当然用大剂量的猪瘟疫苗紧急接种并非上策,因为大剂量猪瘟疫苗使用可能会带来正常猪瘟免疫麻痹的风险。
总之,应该重视疫苗免疫早期的细胞免疫作用,不要一提到疫苗免疫的效果就是抗体水平如何?也不要将紧急免疫蓝耳苗控制了爆发的蓝耳病的效果作为蓝耳苗控制蓝耳病有效的依据,关于使用当前蓝耳苗的利弊笔者在“避其锋,击其虚,可控制猪蓝耳病”一文(见《猪业科学》2012年第3期)作了评价。最后还需强调的是,虽然对于有包膜的RNA病毒,疫苗的细胞免疫的启动一般先于体液免疫,而且作用是短暂的,但如果没有有效的体液免疫系统的建立以及与细胞免疫的相互配合,是不可能最终彻底清除机体内病原的。