日本圆叶海棠(MalusprunifoliaBorkhvar.ringoAsami),别名丸叶海棠,是日本培育苹果苗木中广泛应用的一种基砧,其显著特点是扦插繁育能力强,扦插成活率可达90%以上。经过组培脱毒的圆叶海棠生长量大,抗逆性强,嫁接亲和性好,具有更稳定的生长势,用圆叶海棠扦插繁殖取代实生播种繁殖是苹果育苗中的一次革命。本文建立的Et本圆叶海棠快繁体系,可在短期内获得大量无毒无性系砧木,实现周年生产,满足苹果苗木生产对砧木的需求。
1培养条件
①诱导培养基:MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.03mg/L;②增殖培养基:MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L;③壮苗培养基:MS+6-BA0。1mg/L+NAA0.02mg/L;④生根培养基:1/2MS+IBA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。前3种培养基均加蔗糖35g/L,生根培养基蔗糖为23g/L,pH值5.8,培养温度为25。t2,光照强度为1500~2000Lx,光照时间为14小时/天。
2生长与分化情况
2.1无菌材料的处理
选取日本圆叶海棠春季萌发抽生的新梢茎尖或带腋芽的茎段,剪成长3~5cm的茎段置于三角瓶中,先用少许洗衣粉浸洗2~3分钟,然后用自来水冲洗到没有泡沫为止,在超净工作台上,用0.1%HgCl:消毒8分钟,再用无菌水淋洗5~6次,滤纸吸干水分,剪成长1~2cm的单芽茎段或带几个较小叶片的茎尖,接种于诱导培养基上。
2.2不定芽的分化及丛生芽增殖
芽在诱导培养基上培养20天后开始萌动,伸长成无菌苗。在无菌条件下,将上述伸长苗再切段,每段1~2个芽,接人增殖培养基中,30天后可产生大量丛生芽,将丛生芽再切段,接种在相同培养基上继代培养。增殖系数为7~8。
2.3壮苗培养
在增殖培养基中,获得大量的丛生芽,但芽分化较多,植株生长较细弱,因此,将经过继代增殖的小植株,在生根前接种在壮苗培养基中,进行壮苗培养,获得健壮的无根试管苗。
2.4诱导生根及移栽
取株高2.5~3cm小苗接种到生根培养基上培养2周左右,生根率达98%。然后在调控温室驯化生根20天,当试管苗根长2~3cm、茎干微呈红色、叶大而浓绿时,开口练苗3天,然后用镊子夹出试管苗,栽入已配好营养土(珍珠岩、麦茬土和河沙按l:2:1混合)的六棱型营养钵中,用0.1%多菌灵消毒后,保持80%的湿度,两周后开始长出新根和新叶,成活率达86%。当长出2~4片真叶时开始移人大田,成活率达98%。