三、猪细菌性腹泻的免疫防控
细菌性腹泻尤其是致病性大肠杆菌诱发的仔猪黄白痢是导致初生和哺乳仔猪死亡的重要杀手,同时该病极易和传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒、轮状病毒混感(并发或继发)。基层的小批量散养农户,由于饲养条件较差、环境卫生不佳等不良因素,使该病发生的几率显著增加。该病的防制水平直接关系到这些饲养户仔猪生产的成败,应引起广大基层养猪户的高度重视。
1 猪大肠杆菌性腹泻—仔猪黄白痢
1.1 病原特点
致病性大肠埃希氏菌,革兰氏染色阴性,有菌毛(K88、K99、987P)并产生肠毒素(ST1、2,LTB)。
1.2 发生特点
幼龄常发,头胎多发;黄痢(早发性大肠杆菌病)发生于1~7日龄仔猪;白痢(迟发性大肠杆菌病)发生于10~30日龄仔猪。四季均发,在冬夏或春季温差大时易发。该病占新生仔猪消化道疾病的50%;环境较差、营养不良和气候骤变等应激因素为发病诱因。发病机理是菌毛吸附定植—产生肠毒素—腹泻。
1.3 临床症状与病变特点
1.3.1黄痢 最急性型:生后突死,全窝死亡;急性型:突泻日重,黄色水便,干渴脱水,迅速死亡,耐过成僵猪。
1.3.2白痢 10~20日龄居多;频繁腹泻,初黄后白;寒战叠卧,昏迷虚脱,渐瘦少死(5~6天死亡);多能自然康复。
1.3.3病变 肠膨壁薄,内容物水样或胶冻样。
1.4 宏观流行态势与发生新特点
发病率和死亡率越来越高、流行范围越来越广;畜禽发病日龄越来越大、临床症状越来越重;新的致病血清型持续增多且毒力日渐增强;耐药菌株越来越多且耐药性产生的速度越来越快;药物防治效果越来越差、可选择的药物品种越来越少;常规标准株疫苗免疫效果越来越不稳定;并发与继发感染日渐上升。
1.5 发生的主要原因
滥用药物(治疗与饲料添加)造成强大的药物选择压力;巨大的宿主群体及群体间的交互流动和较低的(不科学的)饲养管理与防病水平为大肠杆菌提供了更多的繁殖和选择进化机会;苗不对型;饲养外环境中病原密度过大且持续存在。
1.6 防制
1.6.1加强日常消毒和卫生管理,将饲养外环境中的病原密度保持在最低水平。
1.6.2开展病原监测,为饲养外环境的洁净度提供科学标准。
1.6.3采用免疫为主、药防为辅的防制方针。
1)常规疫苗可分为多价现地株灭活苗、多价菌毛亚单位苗两大类;按佐剂类型还可分为油乳剂灭活苗、蜂胶佐剂灭活苗、铝胶佐剂灭活苗和蜂胶中药佐剂灭活苗等多种剂型。多价现地株灭活苗,即分离现地株型配合标准株制作多价苗,并随时把握现地株的动态变异情况及时分离鉴定加入苗中。此类苗应用较为广泛,而且免疫效果确实,为当前预防该病的重要苗种。上述苗型中以蜂胶和蜂胶中药佐剂灭活苗效果最佳。多价菌毛亚单位苗,即通过一定的方法提取常见数种血清型菌株的菌毛加佐剂而制成的疫苗。因工艺较复杂应用范围较小。
2)基因工程疫苗 目前共有3类即K88-99双价、K88-LTB双价、ST1-LTB双价基因工程苗;K88-ST1-LTB三价基因工程疫苗等,现介绍K88-ST1-LTB三价基因工程疫苗。①技术特点:本研究是辽宁省益康生物制品厂与有关单位合作利用基因工程技术将ST1、LTB、K88三段基因分别克隆后融合插入质粒载体转化工程菌而制成的三价基因工程疫苗。该基因工程疫苗从中和肠毒素和防止细菌黏附(定植)两方面来预防致病性大肠杆菌的致病作用。我厂对大肠杆菌致病性进行深入研究,经研究表明,大肠杆菌能产生外毒素(ST1、LTB),该毒素可激活肠上皮细胞的腺苷酸(CGMP)的产生,使细胞分泌亢进,发生腹泻和脱水。我厂基于此种致病机理,选取大肠杆菌基因片段中的ST1、LTB、K88作为抗原,并运用生物学技术去除ST1、LTB的毒性,成功地研制出猪大肠杆菌病ST1-LTB-K88三价基因工程菌苗。该苗是运用当今先进的研究手段及生产工艺经科学配方组合而成。目前已申报国家专利。②特点:安全、高效,无毒副作用,免疫保护期长,使用方便;免疫保护谱宽,国内首创;利用基因工程技术,把表达ST1、LTB、K88的目的基因连接起来,插入载体,成功构建基因工程菌株,技术含量高;仔猪通过吃初乳获得被动性免疫,所产生的抗体即可中和肠毒素,还可阻止细菌黏附。③用法与用量:预防由大肠埃希氏菌引起的仔猪黄痢和白痢,用于妊娠母猪和初生仔猪。未经本疫苗免疫过的初产母猪,于产前30~40天和15~20天,各注射1次,每次肌肉注射5毫升/头;经本疫苗免疫过的经产母猪,于产前15~20天肌肉注射5毫升/头;未经免疫的母猪,其新生仔猪2毫升/头。④实际应用概况:本基因工程疫苗通过现场实际应用,在辽宁省应用40万头份、吉林省20万头份、黑龙江省16万头份、北京11万头份、河南省12万头份、河北省13万头份、山东省15万头份,平均免疫保护率达92.46%。安全可靠,效果确实,对仔猪黄白痢均有良好的预防效果。
3)科学的药物防制 应开展药敏试验,选择数种敏感药物交替使用。在药物使用顺序上应坚持先“一线”后“二线”的原则。
致病性大肠杆菌是条件致病性因子,在动物机体健康的条件下,机体的抵抗力尤其是消化道黏膜非特异性的防御能力和微生态系统可抑制该病原的过度增殖而防止腹泻的发生。但由于各种不利因素(如气候骤变、寒冷、潮湿、营养不良、转群、长途运输等)造成机体消化道微生态系统失调和黏膜非特异防御能力下降时,致病性大肠杆菌就可乘虚而入大量增殖产生肠毒素导致腹泻,同时该病还可与流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒和轮状病毒引发的病毒性腹泻发生并发或继发感染,导致多重感染造成仔猪大批发病和死亡。
2魏氏梭菌—仔猪红痢(猪梭菌性肠炎、仔猪传染性坏死性肠炎)
2.1 病原特点
C型产气荚膜梭菌,革兰氏染色阳性,无鞭毛,不运动,可形成芽胞;广布自然界,部分母猪的肠道中亦存在;人亦带菌;猪、绵羊易感;本菌可产生致死性毒素(肠壁繁殖,不入血流)。
2.2 发病特点
主染1~3日龄仔猪,生后10小时即发病;血便、肠坏死;病程短,病死率高。
2.3 临症特点
最急性型:生后1小时或1天发病,当天或次日死亡;突发血痢、迅衰濒死;或无症突死。急性型:一般3天死亡;腥臭红褐水便,消瘦衰弱;呕吐尖叫;我国多见。亚急性型:5~7天死亡;非出血性持续腹泻、极度消瘦。慢性型:2周至数周;间歇或持续腹泻;精神食欲尚好,生长受阻。
2.4 病变特点
空肠出血坏死、外观深红、界限清晰、血性内容物。
2.5 诊断
2.5.1临症病变要点 3日龄血便、病程短、病死率高、空肠清晰坏死。
2.5.2实验室检测 细菌直接镜检:肠内容物涂片,革兰氏染色镜检。毒素检验:肠内容物处理后注射小鼠,如迅速死亡,证明毒素存在。细菌分离鉴定:肠内容物—接种厌气肉肝汤—葡萄糖血琼脂厌氧培养—双层溶血环—遇空气菌落变绿;进一步培养作毒素试验和毒素中和试验。
2.6 防制
主要应用灭活疫苗,如“仔猪红痢灭活苗(铝胶或干粉)”或“仔猪红痢α-β双价基因工程疫苗”,于分娩前半个月和1个月各注射1次。
3蛇形螺旋体—猪痢疾
3.1 病原特点
猪痢疾蛇形螺旋体;9个血清群;革兰氏染色阴性,长螺丝状,以长轴为中心旋转运动;适应性较强;对热、干燥敏感;常见消毒药可迅速将其杀灭。
3.2 发生特点
仅猪发病,鼠、犬、鸟、蝇带菌;各龄均感,7~10周龄多发;常因引猪暴发;无明显季节性;病猪和带毒猪为主要传染源,康复猪带菌长达数月;缓慢持续、缠绵不断。
3.3 临症特点
潜伏期长(3~60天,多为7~14天)。最急性:无症死亡;为本病暴发预兆。急性:便硬覆液、迅速腹泻、黄软水样后含血;渐衰死亡。亚急性与慢性:病情较轻,便液少血,渐瘦滞长,易于复发。
3.4 病变特点
大肠伪膜、皱褶消失;系膜水肿。
3.5 诊断
确诊需实验室检测,粪便镜检;病原分离鉴定;血清学检验:凝集试验、间接荧光抗体、被动溶血试验、琼扩和酶联免疫吸附试验(ELISA)。
3.6 防制
3.6.1药物治疗 疗效快,不复发;药敏择药,交替用药。
3.6.2免疫 尚无可靠的疫苗;“现地灭活佐剂疫苗(现地优势血清群)”的研制与应用是目前预防该病的一个主要方向。
4沙门氏菌—猪副伤寒
4.1 病原
沙门氏菌属的多种菌株;革兰氏染色阴性;对消毒药敏感。
4.2 发生特点
人、多种动物均感,健康带菌,条件发病;各龄均感,幼龄易感,1~4月龄猪多发;病畜和带菌者为主要传染源;四季均发,多雨潮湿、环境应激易发。
4.3 临症特点
急性(败血型):断乳前后仔猪多发,突发死亡;病程短(1~4天),高热沉郁、腹痛下痢、呼吸困难;耳根、胸前和腹下皮肤出现紫红色斑。亚急性和慢性(结肠炎型):临床多见;高热萎靡、寒战堆叠;脓性眼眵、角膜混浊、先便秘后下痢、黄绿恶臭;病程数周;终死或成僵猪。
4.4 病变特点
急性:脾蓝、肿大,切面蓝紫;肠系膜淋巴结索状肿大,切面大理石样;肝坏死。亚急性和慢性:坏死性肠炎—盲、结肠肠壁增厚,覆盖腐乳状物,其下红色溃疡。
4.5 诊断
细菌分离鉴定和血清学检验。
4.6 防制
4.6.1免疫 灭活疫苗:免疫效果不确实,故不常用。弱毒(冻干)活疫苗:疫苗菌种为我国选育的C500,毒力弱、免疫原性好。免疫程序:常发区断乳前后各免疫1次,间隔3~4周。使用注意事项:瓶签注明口服者不能注射;口服应该用新鲜常温饲料,严禁用热料和含有抗生素、酒糟等影响菌苗活力的饲料,疫苗必须用冷开水稀释,用量为20毫升/头;本疫苗适用于30日龄以上健康仔猪。
4.6.2药物治疗 药敏试验择药,交替应用。
5腹泻的辅助治疗
药敏择药:以药敏试验选择数种敏感药物;也可采取试验治疗性择药法,即先少购数种治疗腹泻的新药,然后通过对患病仔猪进行标记试验性治疗,再依据疗效选择几种敏感药物大量购进投入正式治疗,注意交替应用。